“食品安全快檢儀器”是一種快速檢測食品安全的方式,可短時間內(nèi)對可疑食品進行初級篩查和對現(xiàn)場食品安全狀況進行初步評判,提升監(jiān)督成效,預(yù)防食品安全事故發(fā)生。
目前,市場上的快檢技術(shù)主要包括酶聯(lián)免疫技術(shù)、免疫膠體金試紙技術(shù)、化學(xué)比色分析技術(shù)、生物芯片技術(shù)、熒光定量PCR技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)等,其中前三種技術(shù)是目前市場上應(yīng)用比較成熟的現(xiàn)場快檢方法。
01酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)
1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術(shù)發(fā)展成液體標本中微量物質(zhì)的測定方法。
基本原理:
這一方法的基本原理是:
①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
?、谑箍乖蚩贵w與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
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②酶標記的抗原或抗體
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根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
02免疫膠體金試紙技術(shù)
膠體金是氯金酸在還原劑作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。
免疫金標記技術(shù)原理:
膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質(zhì)的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。膠體金對蛋白質(zhì)有很強的吸附功能,蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面,無共價鍵形成,標記后大分子物質(zhì)活性不發(fā)生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標蛋白在相應(yīng)的配體處大量聚集時,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅色或粉紅色斑點。
03化學(xué)比色技術(shù)
化學(xué)比色技術(shù)是食品安全快速檢測中經(jīng)常使用的技術(shù),化學(xué)比色法采用檢測試劑和檢測試紙兩種方法,他們都是利用迅速產(chǎn)生可見顏色變化的化學(xué)反應(yīng)來檢測待測物質(zhì),可借助肉眼比色、可見光分光光度計、比色卡等實現(xiàn)定性或定量。隨著化學(xué)比色技術(shù)的不斷發(fā)展,與其配套的微型檢測儀器也相應(yīng)出現(xiàn),并日趨發(fā)展成熟,與國外不相上下?;瘜W(xué)比色法簡單快速,結(jié)果直觀,廣泛應(yīng)用于食品常量物質(zhì)、食品添加劑、農(nóng)獸藥殘留、重金屬、有機物污染等方面的快速檢測。但該方法也有一些缺點,比如對化學(xué)反應(yīng)自身條件依賴性較強,檢測過程中受到的干擾因素也比較多。